紫外分光光度計在有機化學(xué)研究中得到廣泛的應用。通常用作物質(zhì)鑒定、純度檢查,有機分子結構的研究。在定量方面,可測定結構比較復雜的化合物和混合物中各組分的含量,也可以測定物質(zhì)的離解常數,絡(luò )合物的穩定常數,物質(zhì)分子量鑒別和微量滴定中指示終點(diǎn)以及在液相色譜中作檢測器等。紫外分光光度計的選擇:
我們在選擇各種儀器時(shí),都有一定的標準,如測量精度、或者測量范圍。而在選擇紫外分光光度計時(shí),我們考慮的是光學(xué)構造、光譜范圍、樣品類(lèi)型和分析工具。
光學(xué)構造主要是指紫外分光光度計給出的光是單光束還是雙光束。單光束是通過(guò)單束光進(jìn)行測量,在測量過(guò)程中給定波長(cháng),然后通過(guò)被測物和對照物得到吸光結果。而雙光束是通過(guò)一個(gè)斬光輪將光束一分為二。
光源包括紅外線(xiàn)、紫外線(xiàn)和可見(jiàn)光。鎢燈和鹵素燈一般只覆蓋可見(jiàn)光部分。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見(jiàn)光區域。
紫外分光光度計通常使用光電倍增管和光敏二極管來(lái)測量吸光值。
在大部分的樣品類(lèi)型中,紫外分光光度計可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。
大部分單機型的紫外分光光度計包含了驅動(dòng)儀器運行和管理數據的軟件。高性能的儀器,通常與PC機一起聯(lián)用,需要從制造商提供額外的軟件。同時(shí)用戶(hù)也可以選擇升級軟件以滿(mǎn)足他們的需要。
紫外分光光度計的基本工作原理:
紫外分光光度計利用一定頻率的紫外--可見(jiàn)光照射被分析的有機物質(zhì),引起分子中價(jià)電子的躍遷,它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長(cháng)而變化的光譜,反映了試樣的特征。在紫外可見(jiàn)光的范圍內,對于一個(gè)特定的波長(cháng),吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度,因此丈量光譜可以進(jìn)行定性分析,而且根據吸收與已知濃度的標樣的比較,還能進(jìn)行定量分析。