紫外分光光度計的操作流程： 1.向右推開試樣室蓋，開顯示箱電源開關，波段選擇開關置于"T"，調節"0％T"旋鈕，使顯示器為"0.000".(53WB型如顯示P1，即"T"未調0)。
2.光源電氣箱電源開關向上，指示燈亮，鎢燈開關向上，指示燈亮，溴鎢燈亮。氘燈開關向上，指示燈亮，點燃開關向下2～3秒后迅速撥向上，指示燈亮，氘燈點燃。
3.用波長手輪選擇波長，到位時的手輪旋轉方向要固定，使用波長在200～350nm范圍內，將光源轉換手柄置于"氘燈"處，在350nm～800nm范圍內，將手柄置于"鎢燈"處。
4.檢查T－A轉換的精度：將波段選擇開關置于"T"，池架*孔置于光路，調節"100→0"旋鈕，使顯示為"1.000"；53WB型如顯示P2即參比未調至100％。開關置于"A"應顯示"0.000"，若有偏差用小改錐調節側面"0A"。同理將"T"調到"0.100"，"A"應顯示為"1.000"，若有偏差調節"1A"。再檢查T＝0.500時，應有A＝0.301。
5. 狹縫盡可能選用2nm，或者用4nm。
6.向右推開試樣室蓋，放進待測的參比杯和樣品杯，參比杯必須放在池架的*孔內。再將蓋向左推回用拉桿將參比液推進光路，波段選擇開關置于"A"，調節"100→0"旋鈕。使顯示值為"0.000"用拉桿將樣品液推進光路，顯示值即為被測樣品的吸光度"A"。
紫外分光光度計的留意事項：
1、儀器使用前需開機預熱30分鐘
2、開關試樣室蓋時動作要輕緩
3、不要在儀器上方傾倒測試樣品，以免樣品污染儀器表面，損壞儀器
4、一定要將比色皿外部所沾樣品擦干凈，才能放進比色皿架進行測定
